大連液相色譜儀｜色譜柱｜色譜保修｜南京科捷

　　大連液相色譜儀簡(jiǎn)介：

　　利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對(duì)混合物進(jìn)行先分離，而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。

　　大連液相色譜儀的組成：P600寶石恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器、7725i六通進(jìn)樣閥、進(jìn)口C18柱(150x4.6 5u)、WS600色譜工作站。

　　大連液相色譜儀的特點(diǎn)：分離效能高、靈敏度高、分析速度快、應(yīng)用范圍廣

　　大連液相色譜儀應(yīng)用領(lǐng)域：制藥、生命科學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)

　　液相色譜流動(dòng)相的性質(zhì)要求

　　一個(gè)理想的液相色譜流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測(cè)器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。

　　選好填料(固定相)后，強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少，相應(yīng)的容量因子k降低；而較弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加，相應(yīng)的容量因子k升高。因此，k值是流動(dòng)相組成的函數(shù)。塔板數(shù)N一般與流動(dòng)相的粘度成反比。所以選擇流動(dòng)相時(shí)應(yīng)考慮以下幾個(gè)方面：

　?、倭鲃?dòng)相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹(shù)脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會(huì)溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動(dòng)相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動(dòng)相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。

　　②純度。色譜柱的壽命與大量流動(dòng)相通過(guò)有關(guān)，特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。

　?、郾仨毰c檢測(cè)器匹配。使用UV檢測(cè)器時(shí)，所用流動(dòng)相在檢測(cè)波長(zhǎng)下應(yīng)沒(méi)有吸收，或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測(cè)器時(shí)，應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動(dòng)相，以提高靈敏度。

　　④粘度要低(應(yīng)<2cp)。高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì)，降低柱效，還會(huì)使柱壓降增加，使分離時(shí)間延長(zhǎng)。最好選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動(dòng)相。

　　⑤對(duì)樣品的溶解度要適宜。如果溶解度欠佳，樣品會(huì)在柱頭沉淀，不但影響了純化分離，且會(huì)使柱子惡化。

　?、迾悠芬子诨厥?。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。

　　怎樣選擇液相色譜柱

　　現(xiàn)代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。

　　正相色譜：(液相色譜柱)

　　正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)，以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN，CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強(qiáng)弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低，如：正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

　　反相色譜：(液相色譜柱)

　　反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng)，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合最先被沖出，而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。

　　聚合物填料：(液相色譜柱)

　　聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1～14均可使用。相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料，這類(lèi)填料具有更強(qiáng)的疏水性；大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低。

色譜保修：

　　如何預(yù)防液相泵的故障:

　　要保持泵的良好操作性能,必須維護(hù)系統(tǒng)的清潔,保證溶劑和試劑的質(zhì)量,對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾和脫氣.下面列出預(yù)防泵故障的幾項(xiàng)措施:

　　1).用高質(zhì)量試劑和HPLC級(jí)溶劑；

　　2)、過(guò)濾流動(dòng)相和溶劑；

　　3)、脫氣；

　　4)、每天開(kāi)始使用時(shí)放空排氣，工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液；

　　5)、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中；

　　6)、定期更換墊圈；

　　7)、需要時(shí)加潤(rùn)滑油；

　　8)、查閱有關(guān)泵操作手冊(cè)中的其它建議。

　　處于良好操作狀態(tài)的泵，應(yīng)該能使色譜圖上的基線平穩(wěn)；保留時(shí)間的重復(fù)性好。在等度洗脫時(shí)壓力波動(dòng)小于2%。梯度洗脫時(shí)壓力變化應(yīng)是緩慢和平穩(wěn)的。

　　為了使故障發(fā)生后盡快排除，平時(shí)應(yīng)常備密封、單向閥(入口與出口)、泵頭裝置、各式接頭、保險(xiǎn)絲等部件，以及更換工具。

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