上海飛凡檢測認(rèn)證中心具有專業(yè)的體內(nèi)哺乳動物嗜多染紅細(xì)胞微核試驗團隊，多年來為廣大客戶提供著權(quán)威的體內(nèi)哺乳動物嗜多染紅細(xì)胞微核試驗報告，全國服務(wù)熱線：4007726386 1. 哺乳動物體內(nèi)微核試驗通過分析動物（通常為嚙齒類）骨髓和/或周圍血紅細(xì)胞，用于檢測受試物引起的成紅細(xì)胞染色體損傷或有絲分裂裝置損傷。 2. 微核試驗的目的是要找出導(dǎo)致遺傳損傷的物質(zhì)，正是由于遺傳損傷而導(dǎo)致形成含有遲滯的染色體斷片或整條染色體的微核。 3. 當(dāng)骨髓成紅細(xì)胞發(fā)育成嗜多染紅細(xì)胞，其主核排出，已形成的微核可留在無細(xì)胞核的胞漿中。因為在這些細(xì)胞中沒有主核，便于觀察微核。在經(jīng)染毒的動物中有微核的嗜多染紅細(xì)胞頻率增加是誘發(fā)的染色體損傷的指征。 4. 本文所用定義見附件。 初始注意事項 5由于嗜多染紅細(xì)胞在骨髓形成，本試驗常規(guī)使用嚙齒類動物骨髓。如果已經(jīng)證實脾臟不清除有微核的嗜多染紅細(xì)胞，或已表明對可引起染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目畸變的化學(xué)物有足夠的敏感性，則周圍血中有微核的嗜多染紅細(xì)胞檢測也可接受。微核可以用很多標(biāo)準(zhǔn)來鑒別，包括在微核中是否存在著絲粒和著絲粒DNA的鑒定。有微核的嗜多染紅細(xì)胞頻率是主要的終點。當(dāng)動物連續(xù)染毒4周或更長時間，周圍血中有微核的嗜正染紅細(xì)胞頻率也可用作本試驗的終點。 6. 這樣的哺乳動物體內(nèi)微核試驗特別適用于評價涉及體內(nèi)代謝、藥物動力學(xué)和DNA修復(fù)過程的致突變損傷。并且，體內(nèi)試驗對于進一步研究在體外系統(tǒng)檢測到致突變作用也是有用的。 7. 如有證據(jù)，受試物或活性代謝物質(zhì)不能到達靶組織，該受試物不適用于本試驗。 原理和實驗方法 8. 受試物以適當(dāng)?shù)耐緩饺径緞游?。如利用骨髓，于染毒后適當(dāng)?shù)臅r 間處死動物，并制片、染色【1】【2】【3】【4】【5】【6】【7】 。如利用周圍血，于染毒后適當(dāng)?shù)臅r間采血制片、染色【4】【8】【9】【10】。標(biāo)本供分析微核用。 方法描述 準(zhǔn)備 動物選擇 9. 在利用骨髓時，推薦用小鼠或大鼠。利用周圍血時，推薦用小鼠。如果已經(jīng)證實某品、系動物脾臟不清除有微核的嗜多染紅細(xì)胞，或?qū)σ鹑旧w結(jié)構(gòu)或數(shù)目畸變的化學(xué)物檢測有足夠的敏感性，則此種動物可以利用。一般應(yīng)該利用常用的試驗室品系的健康剛成年動物。在試驗開始時，動物體重變異應(yīng)不超過每種性別平均體重的±20%。 飼養(yǎng)條件 10. 動物室的溫度應(yīng)該為22±3℃，相對濕度范圍應(yīng)為30%～70%（除非是在清潔動物室時），濕度的控制目標(biāo)應(yīng)該是50%～60%。人工照明順序是12h明，12h暗。飼以常規(guī)實驗室飼料，不限飲水。如果將受試物摻入飼料染毒，應(yīng)保證與受試物適當(dāng)?shù)幕旌?。動物可單獨飼養(yǎng)或同性別分籠飼養(yǎng)。 動物的準(zhǔn)備 11. 將健康剛成年的動物隨機分配到對照組和染毒組，飼養(yǎng)籠也隨機安排，以減少飼養(yǎng)籠放置效應(yīng)。動物應(yīng)適應(yīng)實驗室條件至少5天。 受試物準(zhǔn)備 12. 固體受試物在處理動物前應(yīng)溶于或懸浮于適當(dāng)?shù)娜軇┗蛸x形劑，并適當(dāng)稀釋。液體受試物可直接和/或適當(dāng)稀釋。除非有資料證實受試物可以穩(wěn)定貯存，否則應(yīng)新鮮制備受試物。 試驗條件 溶劑/賦形劑 13. 溶劑/賦形劑在所用劑量不應(yīng)產(chǎn)生毒效應(yīng)，不應(yīng)與受試物反應(yīng)。推薦首先考慮使用水作溶劑/賦形劑。對不常用的溶劑/賦形劑，應(yīng)有資料表明其使用可行。 對照 14. 每個試驗對每種性別都應(yīng)包括同時進行的陽性對照和陰性（溶劑/賦形劑）對照。除了受試物染毒之外，對照組動物都應(yīng)與染毒組動物以相同的方式進行操作。 15. 陽性對照組應(yīng)預(yù)期檢測到超過本底值的有微核的紅細(xì)胞頻率增。 涉及地區(qū)：廣東省、浙江省、福建省、海南省、云南省、廣西省、貴州省、新疆省、四川省、重慶市、西藏省、湖南省、江西省、湖北省、上海市、北京市、天津市、安徽省、江蘇省、甘肅省、寧夏省、內(nèi)蒙古省、黑龍江省、吉林省、遼寧省、山東省、陜西省、山西省、河南省、河北省